Семинария располагалась в здании Преображенского монастыря в г. Остроге. После пожара в 1821 г., который уничтожил здания семинарии, в 1825 г. была переведена в г. Аннополь Острожского уезда, где находилась до апреля 1836 г. Затем была переведена в г. Кременец, а с осени 1902 г. в г. Житомир.
В 1919 г. переведена в г. Кременец.
Закрыта в 1939 г.
После Второй Мировой войны возрождена в г. Луцке. В 1945 г. открыты пастырские курсы, которые в 1946 г. были переименованы в Волынскую духовную семинарию.
Указом Учебного Комитета от 15.03.1964 г. в августе 1964 г. Волынская духовная семинария закрыта и переведена в Одесскую духовную семинарию
В октябре 1990 года открыто Луцкое духовное училище, а через год в 1991 году оно получило статус Духовной Семинарии.
В 1993 г. открыты одногодичные, а в 1996 году двухгодичные курсы регентов-псаломщиков при семинарпии.